Энциклопедии, словари, справочники
 Энциклопедии, словари, справочники (поиск)   /   Болезни рыб  Читатели спрашивают 
 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕТАЦЕРКАРИЕВ В РЫБАХ

Для исследования отбирают из водоема по 10 — 15 экз. живых или свежих рыб каждого вида. Регистрируют дату, вид рыбы, название водоема. Проводят наружный осмотр чешуи, кожи, плавников, жабр. С этих участков делают соскобы и компрессорным методом просматривают их под микроскопом. Ножницами разрезают брюшко от анального отверстия до области сердца. С помощью лупы рассматривают сердце, гонады, печень, селезенку, почки, кишечник, серозные покровы, плавательный пузырь. Каждый орган отдельно помещают в чашку Петри или на часовое стекло. С каждого органа берут ножницами небольшие кусочки (3 — 5 мм), помещают на предметные стекла, просматривают под микроскопом на наличие личинок трематод и устанавливают вид метацеркариев.

Исследуют мускулатуру рыб, для чего скальпелем разрезают кожу, начиная от головы, и берут кусочки с поверхностных участков мышц и соскобы с кожи (личинки обычно локализуются в мышечной ткани на глубине 2,5 — 3 мм). Кусочки мышц помещают на предметные стекла или компрессорий и просматривают под микроскопом.

В мускулатуре рыб паразитируют метацеркарии трематод патогенные и непатогенные для человека и животных. Патогенные для человека и животных метацеркарии (описторхисы, меторхисы, клонорхисы, псевдамфистомы) находятся в цистах, характерно наличие у них двух присосок и черного экскреторного пузыря овальной или грушевидной формы, занимающего 1/3 или 1/4 тела личинки. В цистах личинки активно подвижны. Непатогенные метацеркарии — личинки из рода буцефал и рипидокотил. У них имеется одна крупная присоска с пальцеобразными выступами, экскреторный пузырь зигзагообразной формы занимает до 2/3 тела, они слабоподвижны в цистах. Для метацеркариев параценогонимусов характерна более черная экскреторная система с тремя белыми щелевидными просветами.

Для определения жизнеспособности личинок трематод извлекают из органов и тканей рыб, помещают в подогретый до 40°С физиологический раствор, в искусственный желудочный сок (100 мл 0,5%-ного раствора NaCl, 0,5 г пепсина, 0,75 мл 35%-ного раствора соляной кислоты), под лупой осторожно раздражают личинку препаровальной иглой. Наличие даже слабых движений указывает на то, что они живые. Личинок, извлеченных из органов и тканей рыб, освобождают от излишков ткани, кладут на стекло и окрашивают. На препарат наносят 2 капли 3%-ного раствора розоловой кислоты на 70%-ном спирте на 2 мин, добавляют каплю 0,1%-ного раствора едкого калия и еще оставляют на 2 мин. Излишек краски смывают физраствором, препарат высушивают полоской фильтровальной бумаги, накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом. Мышечная ткань и мертвые личинки окрашиваются в розовый цвет, живые личинки не окрашиваются.

Жизнеспособность личинок можно определить под микроскопом с подогревательным столиком при 36 — 37°С . Выделенных личинок переносят на столик, добавляют 2 — 3 капли желчи или 0,5%-ного раствора трипсина. Живые личинки через 5 — 10 мин выходят из цист. Можно также поместить личинку в каплю физраствора и под контролем микроскопа освободить ее от наружной оболочки с помощью препаровальной иглы. Наличие движений у личинки указывает на ее жизнеспособность.

Если трудно установить вид метацеркария, то личинку освобождают от оболочек механическим или химическим путем. Механически оболочку разрывают препаровальными иглами под контролем лупи. Химическим — измельченные кусочки поверхностных мышц рыб (0,3х0,5 см) в количестве 10 — 15 г помещают в искусственный желудочный сок в соотношении 1:10, ставят в термостат при 37 — 40°С на 2 — 3 ч, затем процеживают через марлю. Осадок переносят в чашку Петри, цисты вылавливают пипеткой при проходящем свете под лупой или под микроскопом или. добавив Физраствор круговыми движениями чашки отмывают цисты и они концентрируются в центре чашки. Раствор с края осторожно отсасывают резиновой грушей. Промывают до полного удаления остатков мышечной ткани. Для освобождения от внутренней оболочки цисты помещают в теплый 22 — 24°С раствор трипсина и поваренной соли (на 100 мл 1%-ного раствора NaCl берут 1 г трипсина). Метацеркарии трематод, освобожденные от оболочек, имеют характерные признаки, что служит критерием их видовой принадлежности.

В таблице представлены морфологические признаки личинок трематод, паразитирующих у рыб.

Диагностические признаки личинок трематод (метацеркариев) рыб опасных для человека и плотоядных животных

№ п/п

Виды метацеркариев

У каких видов рыб паразитируют

Локализация в организме рыб

Pазмеры мм, форма цист

Количество оболочек у цисты, их строение

Форма экскреторного пузыря

Наличие присосок и их форма

Подвижность личинки в цисте

Личинки, освобожденные из цисты: размеры, мм; форма тела

1

Opisthorchis felineus

Язь, елец, чебак, плотва, лещ, усач, густера, подуст, жерех, уклея, синец, чехонь, красноперка, сазан, линь

Мышечная ткань, подкожная клетчатки

0.23 — 0.38 х 0,18 — 0,28, овальные, реже круглые

Две, наружная и внутренняя

Почковидная, занимает 1/3 тела личинки

Две круглые, ротовая — 0,088 мм, брюшная — 0,077

Подвижная

0,20 — 0,26 х 0,12 — 0,22, веретенообразная

2

Metorchis albidus

Язь, плотва, красноперка, уклея, гольян, лещ, чехонь, густера

Мышцы, оболочки глаз, жаберные дужки, лучи плавников

0,21 — 0,38 х 0,14 — 0,24. круглые, овальные

То же

То же

Две круглые, одинакового размера

Движения замедленные

0,17 — 0,24 х 0,11-0,17, задний конец тела расширен

3

Pseudamphistomum truncatum

Плотва, лещ, красноперка, густера, елец и другие карповые

Мышечная ткань

0,32 — 0.46х 0,26 — 0,40, круглые

Две, плотно прилегающие

Овальная, нанимает1/3 тела личинки

Две круглые, одинакового размера (0,08 — 0.01)

То же

0,30 — 0,44 х 0,24 — 0,38, тело покрыто шипиками

4

Clonorchis sinensis

Язь, елец, плотва, красноперка, лещ, сазан, густера, уклея, пескарь, гольян, карась, окунь, толстолобик

Мышечная ткань, подкожная клетчатка

0,150 — 0,1 80 х 0,079 — 0.28, почковидная

Наружная и внутренняя, плотно прилегают друг к другу

Почковидная, занимает 1/3 личинки

Две круглые, брюшная больше ротовой

Подвижная в цисте и освобожденная

0,319 — 0,375 х 0,12 — 0,17, удлиненно-овальная

5

Metagonimus yokogawai

Язь, карась, сиг, лещ, толстолобик, сазан, горчак, пескарь, таймень, ленок

В чешуе и плавниках

0,15 — 0,22, шаровидная пли удлиненно-овальная

Две оболочки

Треугольная с закругленными концами

Две круглые, ротовая вдвое больше брюшной

Слабоподвижная

0,3 — 0,4 х 0,09 — 0,10

6

Nanohietus salmincola

Таймень, ленок, сима, горбуша, кета, хариус, пескарь, елец

Мышцы, почки, жабры, чешуя, мышцы плавников

0,20 — 0,35 х 0,17 — 0,33, овальная

Две, наружная и внутренняя

Овальная

Две круглые, равные

Подвижная в цисте и освобожденная

0,35 — 0,65 х 0,17 — 0,36, удлиненно-овальная

7

Echinochasmus perfoliatus

Щука, линь, сазан, лещ, язь, густера, вобла, красноперка, жерех, белоглазка, карась, судак, ерш

Жаберные лепестки

0,080 — 0,110 х 0,079 — 0,098, овальные, круглые

Наружная оболочка прозрачная, эластичная

Две экскреторные полости овальные

Ротовая присоска с крючьями, брюшная в задней трети тела

Движения очень слабые

0,116 — 0,043, ротовая присоска с адоральным диском и с 24 крючьями

8

Rossicotrema donicum

Окунь, ерш, судак

Плавники, поверхность кожи

0,24 — 0,26 х 1,20 — 0,23, эллипсоидные

Вокруг наружной оболочки черный пигмент кольцами

Из-за пигмента не просматриваются

Не просматриваются

Движения очень слабые

0,49 — 0,53 х 0,13 — 0,15, тело овально-продолговатой формы

Метацеркарии трематод, непатогенные для теплокровных

9

Paracoegonimus ovatus

Щука, окунь и карповые

В мышечной ткани

,42 — 0,50 с наружной капсулой до 0,70, сферичные темно-прозрачные

Наружная оболочка в 2 — 4 раза толще внутренней

В виде тройника в кольце со щелевидными пространствами, занимает все тело личинки

Две и орган Брандеса 0,08 — 0,12 0,04 — 0,07

Мало подвижные

Яйцевидной формы

10

Bucephalus polymorplius

Судак, реже окунь, щука, карповые рыбы

На жабрах, в плавниках, в мышцах

0,27 — 0,36 х 0,20 — 0,34

Тонкие, неравномерно отлетают друг от друга

Зигзагообразная, занимает 2/3 тела личинки

0,18 — 0,22, имеет пальцевидные мышечные отростки

Движения активные у освобожденных от цист личинок

0,6 — 2,3x0,35, 7 пальцевых выростов

11

Rhipidocotyle illense

Карповые рыбы

На жабрах, плавниках, в мышцах, глазах, мозге, подкожной клетчатке

0,27 — 0,37 прозрачная сферически овальная

Тонкие, неравномерно отлетают друг от друга

Зигзагообразная, занимает 2/3 тела личинки

0,18 — 0,23 х 0,15 — 0,22, имеет два ушкообразных выроста

Движения замедленные у освобожденных личинок

0,8 — 1,0 х 0,16 — 0,28, имеет два усико образных выроста

Для установления видовой принадлежности личинок, особенно из сем. Opisthorchidae, патогенных для человека и животных, нередко прибегают для постановки биопробы. Для этого подопытным животным (котятам, морским свинкам, хомякам) скармливают мясо рыб с метацеркариями трематод или мелкую рыбу. Содержат их в клетках. Вид личинки определяют через 3 — 4 недели путем обнаружения в фекалиях животных яиц трематод или половозрелых гельминтов в печени, желчном пузыре, кишечнике (в зависимости от вида гельминтов) при вскрытии подопытных животных.


^ЗГЛ: ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕТАЦЕРКАРИЕВ В РЫБАХ