Энциклопедии, словари, справочники
 Энциклопедии, словари, справочники (поиск)   /   Инкубация яиц сельскохозяйственной птицы  Читатели спрашивают 
 

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ НА ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ (от латинского infectio — порча; заразный), для постановки диагноза на инфекционные заболевания, вызываемые бактериями и грибами, необходимо исследовать живые недоразвитые или погибшие эмбрионы. Если погибший эмбрион остаётся [остается] на некоторое время в инкубаторе, то в нём [нем] начинает размножаться гнилостная микрофлора, поэтому выделитъ возбудители инфекции, вызвавшие его гибель, трудно. Исследуют эмбрионов сразу после гибели, а если такой возможности нет, то отходы инкубации сохраняют в холодильнике. При исследовании отходов инкубации используют бактериологические и серологические методы, а также метод заражения эмбрионов и суточный молодняк. Для бактериологических исследований используют эмбрионы, погибшие в разные сроки развития. Вскрытие отходов инкубации для бактериологических исследований проводят в боксе в стерильных условиях. При бактериологических высевах дезинфицируют скорлупу над пламенем горелки. Острым концом ножниц пробивают отверстие в области воздушной камеры, затем осторожно вырезают в боковом участке яйца окно. Пастеровской пипеткой засасывают небольшое количество аллантоисной жидкости и делают посевы на питательных средах. Яйцо вскрывают и эмбрион с желточным мешком извлекают стерильным пинцетом в стерильную чашку Петри. Для быстрого изготовления препаратов применяют и экспресс-методы. Каплю аллантоисной, амниотической жидкости, крови или бульонной культуры берут простерилизованной платиновой петлёй [петлей] или пастеровской пипеткой. Прежде чем сделать мазок из органов, вначале прижигают раскалённым [раскаленным] шпателем участок тканей и производят стерильным скальпелем разрез, а затем с разреза делают соскоб и переносят его на стекло. Если мазки готовят из твёрдой [твердой] среды или содержимого кишечника, желтка, то предварительно на стекло наносят каплю стерилизованной воды, физиологического раствора или какой-либо жидкой питательной среды (мясо-пептонного бульона), а затем уже частицы взятого материала эмульгируют в имеющейся капле и размазывают по стеклу. Иногда после разреза стерильным скальпелем тканей захватывают часть органа пинцетом и делают убывающий по плотности мазок на предметном стекле. Мазки высушивают и фиксируют обычным способом, принятым в микробиологии. Фиксированные мазки окрашивают различными методами в зависимости от исследования на то или иное инфекционное заболевание. Для простой окраски применяют спиртоводный раствор фуксина 1:10 (Прейфера), лефлеровскую метиленовую синьку и сафранин. На фиксированный мазок наносят несколько капель краски, затем её [ее] смывают дистиллированной водой, и мазок сушат между полосками фильтрованной бумаги. Продолжительность окраски зависит от вида и качества красящего раствора, степени восприимчивости к нему микроба и от толщины мазка. Сложные методы окраски основаны на особенностях физико-химического строения микробной клетки, сущность их заключается в воздействии на мазок двух красящих веществ, из которых одно является основной краской, а другое — дополнительной. Мазок после воздействия первой краски обесцвечивают, и только после этого подвергают дополнительному окрашиванию. В качестве обесцвечивающих веществ применяют кислоту, щёлочь [щелочь], спирт, ацетон и другие химические реагенты. Окраску спор производят по методу Виртца в модификациях Саватеева, Шеффера и Фултона, методом Пешкова, Мюллера, Клейна. Для жгутиков и других органоидов также используют сложные методы окраски. Промывные воды после окраски сливают в специальный сосуд с последующим обеззараживанием, отработанную фильтровальную бумагу сжигают, а использованные мазки дезинфицируют. Бактериологические исследования проводят, соблюдая стерильность, чтобы не занести посторонних микробов. С этой целью проводят посевы из органов и тканей эмбрионов на ряд питательных сред, в зависимости от предполагаемого вида инфекции. Иногда бывает достаточно провести посевы на простые среды, чаще же требуется их набор с углеводами, элективными средами и так далее. Все среды после посева помещают в термостат для выращивания. Как правило, учёт [учет] полученных результатов производят через сутки роста культуры в термостате, делают мазки с МПА и МПБ и отмечают все изменения со средами. Обычно наблюдения ведут 7-10 суток. В случае необходимости проводят посевы на другие питательные среды. Заражение яиц, эмбрионов и лабораторных животных проводят общепринятыми методами. Серологический метод диагностики аллантоисной жидкости часто осуществляется при вирусных заболеваниях (болезни Ньюкасла, гриппе птиц, респираторном микоплазмозе и других).


^ЗГЛ: МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ НА ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ.