Как проехать Контакты 
Библиотека
Общие сведения
Вход для зарегистрированных читателей
База данных АГРОС
Авторитетный файл наименований научных учреждений АПК
Библиотека-депозитарий ФАО
Издания
Выставки
Виртуальные выставки
Электронные библиотеки ЦНСХБ
Сельскохозяйственная Электронная Библиотека Знаний (СЭБиЗ)
Биографическая энциклопедия ученых-аграриев

ЦЭБС АПК
Сводный каталог библиотек АПК
Каталоги библиотек АПК
Обменный фонд
Электронная библиотека Сводного каталога
Ведомственный экземпляр НИУ

Услуги
Избирательное распространение информации
Доставка документов
Терминал удаленного доступа
Виртуальное библиографическое обслуживание
Форум читателей ЦНСХБ
Инструкции
Информационные услуги
Транслитерация
Баннеры ФГБНУ ЦНСХБ
Рейтинг@Mail.ru Яндекс.Метрика
[Ввод запроса]

^ШХР: П 3568 2011 4 Спецвып.
^АВТ: Марзанова С.Н. (Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина).; Алексеев Я.И.; Коновалова Н.В.; Турбина И.С.; Девришов Д.А.; Сочивко Д.Г.; Марзанов Н.С.
^ЗГЛ: Разработка метода диагностики комплексной аномалии позвоночника (CVM) методом ПЦР в реальном времени у черно-пестрого скота
^ВЫХ: Проблемы биологии продуктивных животных, 2011; N 4 Спецвып. - С. 79-82
^ДАТ: 2011
^ПРМ: Рез. англ..-Библиогр.:с.81
+Реферат

^РЕФ: Разработан метод выделения ДНК и использования флуоресцентных и аллель-специфических зондов (ЗН) для определения миссенс-мутации (ММ) при диагностике аутосомно-рецессивного наследственного заболевания - комплексной аномалии позвоночника (CVM-complex vertebral malformation) у КРС черно-пестрой породы. В гомозиготном состоянии аллель CV вызывает эмбриональную смертность, массовые аборты и мертворождаемость. У новорожденных телят наблюдаются анатомические аномалии в шейном и грудном отделах позвоночного столба, уменьшение числа ребер и контрактура передних и задних конечностей. Причиной CVM является ММ гена SLC35A3, замещение гуанина на тимин (G559T), а в синтезируемом белке - валина на фенилаланин в 180-й позиции (V180F). На CVM исследовалась кровь, взятая у коров, и семя быков-производителей черно-пестрого генеалогического корня. Для выделения ДНК использовались классический (фенольно-хлороформный) и сорбентный (СБ) методы. Классический метод давал высокоочищенную ДНК, но требовал больших затрат времени; менее качественный СБ метод был прост в исполнении, когда очищенная ДНК не требует длительного хранения (бытовой холодильник, при t от 2 до 8° C в течение 1 нед). Представлена программа амплификации и характеристика параметров термоциклирования для диагностики мутантного аллеля (МА), вызывающего CVM. Для детекции мутаций в исследуемом геноме применялись аллель-специфические Taq-Man ЗН. Были взяты 2 ЗН: один из них специфически гибридизовался при температуре проведения элонгации цепей с аллелем дикого (нормального) типа, другой - с МА. Эти ЗН метились разными флуорофорами, а результаты реакции регистрировались на 2 различных каналах детекции прибора для ПЦР-РВ - Green и Yellow. Нормальный аллель G давал рост сигналу по каналу Green (детектируемый флуорофором FAM), а МА-Т - по каналу Yellow (RCG). Результаты оценивались по наличию/отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией. Те образцы, графики флуоресценции которых пересекали эту линию, считались положительными. Установлено, что у гетерозиготных животных-носителей МА CV - обе кривые пересекали пороговую линию, у гомозиготных по аллелю CV - кривая линия, соответствующая каналу Yellow, располагаясь над, а другая - под ней. Т.о., в разработанном методе были изучены этапы выделения и хранения ДНК, использование флуоресцентных и аллель-специфических ЗН для определения аллеля CV при диагностике комплексной аномалии позвоночника у КРС черно-пестрой породы. Табл. 1. Библ. 7.

^TRN: 1261198
^ВИД: Статья из журнала
^ЯЗК: Русский
+Индексирование



  назад   Главная страница ЦНСХБ  

Все права защищены 1998-2017 год ©Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Центральная научная сельскохозяйственная библиотека»