Как проехать Контакты 
Библиотека
Общие сведения
Вход для зарегистрированных читателей
База данных АГРОС
Авторитетный файл наименований научных учреждений АПК
Библиотека-депозитарий ФАО
Издания
Выставки
Виртуальные выставки
Электронные библиотеки ЦНСХБ
Сельскохозяйственная Электронная Библиотека Знаний (СЭБиЗ)
Биографическая энциклопедия ученых-аграриев

ЦЭБС АПК
Сводный каталог библиотек АПК
Каталоги библиотек АПК
Обменный фонд
Электронная библиотека Сводного каталога
Ведомственный экземпляр НИУ

Услуги
Избирательное распространение информации
Доставка документов
Терминал удаленного доступа
Виртуальное библиографическое обслуживание
Форум читателей ЦНСХБ
Инструкции
Информационные услуги
Транслитерация
Вы являетесь

посетителем
Рейтинг@Mail.ru Яндекс.Метрика
[Ввод запроса]

^ШХР: П 3575 2015 4
^АВТ: Самуйленко А.Я. (Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности. пос. Биокомбината, Московская обл.).; Гулюкин М.И.; Василевич Ф.И.; Ковальчук С.Н. ; Глазко Т.Т.; Бабий А.В.; Архипов А.В.; Косовский Г.Ю.
^ЗГЛ: ДНК-диагностика анаплазмоза крупного рогатого скота
^ВЫХ: Российский паразитологический журнал, 2015; N 4. - С. 72-78
^ДАТ: 2015
^ПРМ: Рез. англ..-Библиогр.:с.76
+Реферат

^РЕФ: Разрабатывали метод ДНК-диагностики анаплазмоза КРС. Отбирали пробы крови из хвостовой вены коров с использованием ЭДТА в качестве антикоагулянта. ДНК выделяли с помощью набора Sorb-М. Для анализа гена msp4 использовали последовательности разных изолятов Anaplasma marginale. Разработали праймеры для амплификации фрагмента гена msp4 методом ПЦР с целью выявления А. marginale в крови КРС . Msp4 - иммунодоминантный белок. Сравнительный анализ последовательностей msp4 показал высокую степень их идентичности - 98-100%. Прямой и обратный праймеры подобраны на участки гена msp4, имеющие идентичность 100% у всех известных изолятов А. marginale. Видоспецифичность праймеров MSP4-F и MSP4-R была проверена in silico путем сравнения их последовательностей с геномными библиотеками с использованием программы BLASTN. Полная комплементарность праймеров к участкам генома нецелевых организмов не выявлена. Фрагменты гена msp4 были лигированы в плазмидный вектор pGEM-Т, и клонированы в клетках E. coli DH5a. Секвенирование полученных плазмид pGEM-msp4 осуществляли по методу Сэнгера. Полученные нуклеотидные последовательности имеют 99-100% идентичности с фрагментом гена msp4 разных изолятов А. marginale. Для анализа специфичности праймеров использовали образцы ДНК КРС и овец. Анализ результатов ПЦР методом электрофореза в 2%-ном агарозном геле показал отсутствие характерного для А. marginale фрагмента ДНК длиной 157 п. н., что говорит об аналитической специфичности ПЦР с праймерами MSP4-F и MSP4-R. Для определения аналитической чувствительности ПЦР при 10-кратном разведении плазмиды pGEM-msp4 (фрагмент гена длиной 157 п. н.) получены образцы, содержащие 107-100 копий гена msp4 и выше. Метод выявления A. marginale был апробирован на образцах ДНК, выделенных из цельной крови коров, используя плазмиду pGEM-msp4. В качестве отрицательного контроля использовали образец, не содержащий ДНК. Т.о., разработан и апробирован метод ДНК-диагностики анаплазмоза КРС, чувствительность метода позволяет выявить 100 копий гена msp4 A. marginale и выше. Испытания свидетельствуют о 100%-ной повторяемости и воспроизводимости метода. Ил. 2. Табл. 15.

^TRN: 1578307
^ВИД: Статья из журнала
^ЯЗК: Русский
+Индексирование



  назад   Главная страница ЦНСХБ  

Все права защищены 1998-2017 год ©Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Центральная научная сельскохозяйственная библиотека»