^ШХР: П 25700 2015 46(10)
^АВТ: Liu Ren-qiang; Cai Jian-ping; Wang Ming
^ЗГЛ: Cloning, Expression and Activity of Cathepsin В in
Eimeria tenella [Клонирование, экспрессия и активность
катепсина В в различных стадиях развития Eimeria tenella.
(Китай)]
^ВЫХ: Acta veter.zootechn.sinica, 2015; Т.46,N 10. - С.
1838-1843
^ДАТ: 2015
^ПРМ: Рез. англ..-Библиогр.:с.1843
+Реферат:
^РЕФ: Проведено клонирование гена катепсина В Eimeria tenella
(EtcatB) с последующей экспрессией и анализом его
функциональной активности. Используя опубликованные данные о
нуклеотидной последовательности E. tenella, получена кДНК гена
EtcatB и клонирована в неспорулированном штамме (ШТ) Hougton.
Ген EtcatB был рекомбинирован в прокариотный вектор транс-Е1 и
трансформирован в Escherichia coli ШТ Rosetta с целью
последующей экспрессии. Очищенный белок использовали для
иммунизации кроликов и получения поликлональных антител,
которые регистрировали методом ELISA, с помощью
гель-электрофореза анализировали зимографию желатина. Методом
вестерн-блоттинга и ПЦР в реальном времени определена
экспрессия EtcatB и EtcatL на разных стадиях развития E.
tenella. Определен размер гена EtcatB в 1539 п.н., который
кодирует 512 аминокислот. После индуцирования фрагмента кДНК
EtcatB 1мМ/л-1 изопропилтиогалактозидом при 37° C в
течение 4 ч белок экспрессировался в форме телец включения, а
при 4° C в течение ночи он был индуцирован в растворимой
форме. Активность EtcatB была выше на стадиях гаметофитов и
мерозоитов, постепенно увеличиваясь в процессе спорулирования.
Возможность клонирования и экспрессии катепсина В E. tenella
создала основу для дальнейшего изучения роли гена,
ответственного за инвазированность цыплят кокцидиями. Ил. 7.
Библ. 20.
^TRN: 1620556
^ВИД: Статья из журнала
^ЯЗК: Китайский
+Индексирование:
^РУБ: 68_41_55_31_29
^УДК: 619:616.993.192.1
^ТЕР: EIMERIA [ЭЙМЕРИИ]. ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ (Gene expression).
КАТЕПСИНЫ (Cathepsins). АКТИВНОСТЬ. КЛОНИРОВАНИЕ ДНК (DNA
cloning) [КЛОНИРОВАНИЕ ГЕНОВ]. КИТАЙ (China) [КНР].
EIMERIA TENELLA.
^РТЗ: EIMERIIDAE. PROTOZOA [ОДНОКЛЕТОЧНЫЕ; ПРОСТЕЙШИЕ]. АЗИЯ
(Asia). БЕЛКИ (PROTEINS) [ПРОТЕИНЫ]. ВОСТОЧНАЯ АЗИЯ (East
Asia). ГИДРОЛАЗЫ (HYDROLASES). ЕВРАЗИЯ (Eurasia). МЕТОДЫ
(Methods). МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ. ПЕПТИДАЗЫ
(PEPTIDASES). ПЕПТИДГИДРОЛАЗЫ. ПЕПТИДЫ (PEPTIDES).
ПРОТЕИНАЗЫ (PROTEINASES) [ПРОТЕАЗЫ; ПРОТЕОЛИТИЧЕСКИЕ
ФЕРМЕНТЫ]. СТРАНЫ АТЭС. СТРАНЫ БРИКС. СТРАНЫ МИРА.
ФЕРМЕНТЫ (Enzymes) [ЭНЗИМЫ].