
Как проехать	Контакты	Включить версию сайта для слабовидящих

Библиотека

ЦЭБС АПК

Услуги

[Ввод запроса]

^ШХР: П 3596 2016 4
^АВТ: Донник И.М. (Уральский научно-исследовательский ветеринарный институт. Екатеринбург). ; Петропавловский М.В.; Хрунык Ю.Я.; Рябухин И.В. ; Вялых И.В.
^ЗГЛ: Технология ранней диагностики лейкоза крупного рогатого скота на основе синцитиального теста = The technology of early diagnosis of bvl based on syncytial test
^ВЫХ: Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии, 2016; N 4. - С. 57-61
^ДАТ: 2016
^ПРМ: Реф. англ..-Библиогр.:с.61
+Реферат:

^РЕФ: В Уральском НИВИ впервые разработана и апробирована технология ранней идентификации вируса лейкоза (ВЛ) КРС синцитиальным тестом (СТ), определена его чувствительность и специфичность. Для осуществления СТ использовали клеточную культуру (КК) CC81 (фибробласты легких кошки). Технология проведения СТ: предварительно размораживают КК CC81, наносят по 2 мл в лунку в 12-луночный планшет, инкубируют 2 дн. при 37 град. C в CO₂-инкубаторе. Через 2 сут в сформировавшийся монослой CC81 добавляют лейкоцитарную смесь из образцов (ОБ) крови исследуемых инфицированных ВЛ и контрольных животных. Взятые в вакуумные пробирки с ЭДТА ОБ крови центрифугируют при 2600 об./мин в течение 30 мин. Далее удаляют пипеткой супернатант, собирают интерфазу светлого цвета, содержащую лейкоциты (ЛК). ЛК несколько раз промывают дистиллированной водой (ДВ) и фосфатным буфером (ФБ), каждый раз повторно центрифугируя. Конечный осадок ЛК ресуспендируют в 10%-ной среде с антибиотиками и наносят в лунки планшета, содержащие 2-дневный монослой КК CC81. Для заражения монослоя необходимо наличие не менее 5 <.>10⁶ ЛК в 1 мл среды. Через 2 и 4 дн. после заражения (ПЗ) среду из лунок удаляют, вносят свежую с конц-ией сыворотки 6 и 2% соответственно. На 7-й дн. ПЗ клетки 3-кратно промывают ФБ и окрашивают в течение 3 мин р-ром Грунвальда-Гимза (ГГ). Далее ГГ удаляют, клетки промывают ДВ и снова вносят р-р ГГ на 15 мин, после чего промывают ДВ. Окрашенную КК исследуют микроскопически на наличие ЦПД в виде синцитиев - многоядерных клеточных образований, типичных для ВЛ. Для подтверждения диагноза предложено использовать ПЦР, т.к. пассирование инфицированных ЛК на КК CC81 позволяет повысить число копий вирусной ДНК, что поднимает эффективность ПЦР. Данная технология позволяет повысить уровень идентификации вирусоносителей на 5-6%, с высокой чувствительностью, специфичностью, 100%-ной согласованностью и воспроизводимостью результатов. Все это способствует оздоровлению хозяйств от ВЛ в наиболее ранние сроки. Ил. 2. Библ. 22.

aref2 1 For the first time in the Ural region of positive results on the study of the diagnostic value of diagnostic methods of virus culture bovine leukemia using cell culture CC81 (lung fibroblasts cats). The parameters of the test method of early identification technology leukemia virus of cattle, was developed defined and studied, positive results during testing, to determine the sensitivity and specificity of the method.

^TRN: 1650643
^ВИД: Статья из журнала
^ЯЗК: Русский
+Индексирование:

—


назад	Главная страница ЦНСХБ